Технология ЭПР - Методика

MMS-технология включает исследования функциональности и конформационного состояния молекул альбумина средствами электронного парамагнитного резонанса (ЭПР). В частности, проводятся исследования альбумина в различных сочетаниях концентраций «исследуемый объект – полярный растворитель  - спиновая метка». Этими условиями моделируются различные in vitro состояния молекул альбумина при связывании, переносе и диссоциации лигандов (Taboada et al., Chemical Physics, 2007; Reed et al., JBC, 1989).  Путем добавления спин-меченой жирной кислоты могут быть обследованы места связывания альбумина с высоким и низким сродством.  В настоящий момент используемая в технологии MMS спиновая метка имеет 7 центров связывания на человеческом сывороточном альбумине (Bhattacharya et al. JMB, 2000), три из которых характеризуются высоким сродством и четыре – более низким сродством к молекулам среднецепочных жирных кислот (Simard et al., PNAS, 2005). Моделирование экспериментальных ЭПР-спектров позволяет вычислять константы связывания, заселенность центров связывания и иные биофизические параметры для исследуемых центров связывания в различных индуцированных состояниях альбумина.

На основании полученных биофизических параметров могут быть рассчитаны интегральные характеристики сывороточного альбумина и его транспортные свойства (BE, RTQ, DTE).

BE , англ. binding efficiency - эффективность связывания, физико-химическое свойство центров связывания

RTQ, англ. real transport quality – реальное качество транспорта, глобальный параметр транспортных свойств альбумина

DTE, англ. detoxification efficiency – детоксификационная эффективность, параметры молекул альбумина в компетативных условиях

Данные параметры были нормированы по большой выборке данных пациентов.

Русский